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1，组化

实验原理：组化（IHC），是应用抗原与特异性结合的原理，通过酶标与底物反应显色，从而对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究，称为组织化学技术。组化（IHC）具有特异性强、敏感度高、定位准确的优点。

1，荧光

实验原理：荧光（IF），是应用抗原与特异性结合的原理，通过荧光标记对组织细胞内抗原进行定位、定性及定量的研究。目前皮诺飞生物主要可以对石蜡切片、冰冻切片、细胞爬片、组织芯片进行荧光检测。皮诺飞生物目前已突破传统的荧光双标限制，开发出多色荧光技术（多可达7色）。

意义

免yi组织化学的临床应用主要包括以下几方面：

（1）的诊断与鉴别诊断；

（2）确定转移性的原发部位；

（3）对某类进行进一步的病理分型；

（4）软组织的一般需根据正确的组织学分类，因其种类多、组织形态相像，有时难以区分其组织来源，应用多种标志进行组化研究对软组织的诊断是不可缺少的；

（5）发现微小转移灶，有助于临床方案的确定，包括手术范围的确定。

（6）为临床提供方案的选择。

阻断内源性过氧化物酶：滴加3%1甲1醇-H2O2，室温避光孵育15min，将玻片置于PBS（PH7.4）中在脱色摇床上晃动洗涤3次，每次5min。

预杂交：滴加预杂交液，37°C孵育1h。

杂交：倾去预杂交液，滴加含探针has-circ-ST6GALNAC6 probe 杂交液，浓度6ng/ul，恒温箱37度杂交过夜。

杂交后洗涤：洗去杂交液，2×SSC，37°C 洗10min，1×SSC，37°C洗2×5min，0.5×SSC室温洗10min。若非特异杂交体较多，可以增加甲酰胺洗涤。

滴加封闭液：滴加封闭血1清（正常兔血1清），室温30min。

滴加鼠抗地1高辛标记过氧化物酶（anti-DIG-HRP）：倾去封闭液，滴加anti-DIG-HRP。37°C孵育50min，后PBS洗3次×5min。